ANA (antinukleāro antivielu) diagnostikas tests

Antinukleāro antivielu (ANA) tests tiek izmantots kā primārais tests, lai novērtētu pacienta autoimūno saistaudu traucējumu stāvokli. Tie ir traucējumi, kas ietekmē daudzus audus un orgānus visā ķermenī. Ko parāda testa rezultāti? Kas ir ANA? Kādas slimības var noteikt ANA?

Satura rādītājs:

1. ANA tests - kas ir antinukleārās antivielas?
2. ANA tests - izmantošana diagnostikā
3. ANA tests - ANA klātbūtne veselīgu cilvēku asinīs
4. ANA tests - kas ir nosaukums?
5. ANA tests - kad jāveic ANA tests?

ANA saīsinājums nāk no angļu nosaukuma anti-nukleārās antivielas, kas poļu valodā tiek tulkots kā "antinukleārās antivielas". Šīs molekulas pieder olbaltumvielām, ko sauc par autoantivielām, kas ir olbaltumvielas, kas uzbrūk ķermenim, kas tās ražo.

ANA tests - kas ir antinukleārās antivielas?

Cilvēka ķermenī ir daudz aizsardzības mehānismu pret patogēniem. Viens no tiem ir humorāla imunitāte. Tās pamatā ir aizsargājošu antivielu ražošana. Veseliem cilvēkiem imūnsistēma ražo antivielas pret ārvalstu antigēniem.

Dažreiz tomēr ir situācijas, kad tiek ražoti autoantigēni, kas ir vērsti pret mūsu pašu ķermeņa olbaltumvielām. Šis process ir būtisks autoimūno slimību ģenēzei.

Antinukleārās antivielas uzbrūk olbaltumvielām un citām molekulām, kas veido kodolu.

Ir daudz dažādu veidu ANA. Šo antivielu sadalīšanās pamatā ir kodola komponentu veidi, pret kuriem šīs molekulas ir vērstas. Atkarībā no veida ANA var saistīties gan ar atsevišķiem proteīniem, gan ar kompleksiem kompleksiem.

Piemēram, ir antivielas pret kodola kanāliem un histoniem, t.i., molekulas, uz kurām ir uztīta DNS.

ANA uzbrukumus var atšķirt:

• IET
• histoni
• ribonukleoproteīni
• Kodola RNS
• nonhistone olbaltumvielas

Visi uzskaitītie komponenti ir raksturīgi šūnu kodolam.

ANA asinīs atrodas dažādu slimību laikā. Tas ietver autoimūnos traucējumus, vēzi un dažus infekciju veidus. Tas ļauj izmantot antinukleāras antivielas noteiktu slimību stāvokļu diagnostikā.

ANA tests - izmantošana diagnostikā

ANA testu izmanto antinukleāro autoantivielu noteikšanai pacienta asinīs. Šī pārbaude ir svarīga tādu slimību diagnosticēšanai kā:

• sistēmiskā sarkanā vilkēde
• Šegrena sindroms
• sklerodermija
• polimiozīts
• dermatomiozīts
• autoimūns hepatīts
• zāļu reakcijas izraisīta velmēšana

Pozitīvs ANA testa rezultāts ir diagnostisks tikai tad, ja klīniskie simptomi to apstiprina. Antinukleāro antivielu līmeņa pārbaude var būt noderīga arī slimības progresēšanas uzraudzībā.

ANA noteikšanai un novērtēšanai parasti izmanto šādus testus:

• netieša imūnfluorescence
• ELISA-enzīma imūnsorbcijas tests

Netiešās imūnfluorescences metode

Netiešā imūnfluorescence ir viens no visbiežāk izmantotajiem ANA testiem. Parasti šajā testā tiek izmantotas Hep-2 šūnas. Tos uz mikroskopa priekšmetstikliņiem uzklāj plāna slāņa formā. Tad no pacienta savākto serumu uz tiem uzliek un inkubē kopā ar Hep-2 šūnām.

Ja ANA ir ņemtajā paraugā, tos pēc inkubācijas perioda atklāj formā, kas saistīta ar antigēniem šūnas kodolā. To var redzēt, pievienojot fluorescējošu etiķeti, kas saistās ar antivielām.

Šim nolūkam visbiežāk tiek izmantots fluoresceīns vai rodopsīna B izotiocianāts (FITC) vai rodopsīns B. Molekula fluorescē, ja tam tiek pakļauts noteikta viļņa garuma gaismas stars. Fluorescences novērošanai un novērtēšanai izmanto mikroskopu.

HEp-2 šūnās var novērot dažādus fluorescences modeļus atkarībā no antivielu veida, kas atrodas cilvēka serumā, un antigēna lokalizācijas. To analīze ļauj noteikt paraugā esošo antivielu tipus.

Antivielu līmeni nosaka, veicot sērijveida asins seruma atšķaidījumus. ANA tests tiek uzskatīts par pozitīvu, ja fluorescence tiek novērota pie titra 1: 40/1: 80. Tomēr rezultātam virs 1: 160 ir būtiska diagnostikas nozīme.

Fermentu imūnanalīze (ELISA)

Fermenta imūnanalīzē (ELISA) ANA noteikšanai izmanto mikrotitrēšanas plāksnes ar antigēniem. Katra plāksnes bedre ir pārklāta ar vienu vai vairākiem antigēniem. Tas kalpo specifisku antivielu noteikšanai.

Asins serumu inkubē plāksnes iedobēs un pēc tam izmazgā. Ja paraugā bija antinukleāras antivielas, tās pēc mazgāšanas paliks saistītas ar attiecīgajiem antigēniem uz mikrotitera plāksnes.

Nākamajā testa posmā plāksnes iedobē pievieno otro ar fermentiem saistītu antivielu. Fermentatīvās reakcijas ietekmē šķīdums maina krāsu.

Krāsu atšķirība ir proporcionāla antigēnu saistīto antivielu daudzumam plāksnes iedobē. Iegūtā šķīduma krāsu var novērtēt ar spektrofotometrisko metodi, t.i., mērot caur šķīdumu pārraidītās gaismas kūļa intensitāti.

ANA tests - ANA klātbūtne veselīgu cilvēku asinīs

Tiek lēsts, ka 5% cilvēku populācijā antinukleārās antivielas ir asinīs koncentrācijā, kas tiek uzskatīta par diagnostiski nozīmīgu, neatkarīgi no slimības stāvokļa.

Tā kā ANA biežums palielinās līdz ar vecumu, pat 10-37% veselīgu cilvēku, kas vecāki par 65 gadiem, ANA klātbūtne ir pozitīva. Šādi gadījumi ir biežāk sastopami sievietēm nekā vīriešiem.

ANA tests - kas ir nosaukums?

ANA testa raksturīgā vērtība ir titrs. Tas norāda seruma atšķaidīšanas pakāpi, kurā antinukleārās antivielas kļūst nenosakāmas. Jo augstāka ir ANA koncentrācija asinīs, jo augstāks titrs ir testa rezultātos.

Ja titrs pārsniedz 1: 160, ieteicams veikt antinukleāro antivielu specifiskuma testu. Šie papildu testi jāveic kopā ar pacienta klīniskās vēstures analīzi un fizisko izmeklēšanu. Šo darbību mērķis ir diagnosticēt vai izslēgt autoimūnos traucējumus.

Tomēr jāatzīmē, ka šāds rezultāts notiek 5% pacientu neatkarīgi no slimības stāvokļa. Pārbaudes rezultāts ir diagnostisks tikai tad, ja ir citi slimības simptomi.

Negatīvs ANA testa rezultāts norāda, ka maz ticams, ka pacientam būs sarkanā vilkēde vai cita autoimūna slimība.

ANA tests - kad jāveic ANA tests?

ANA tests tiek nozīmēts, kad pacienta simptomi norāda uz sistēmiskiem autoimūniem traucējumiem. Tās var būt ļoti acīmredzamas un nespecifiskas, un laika gaitā tās var mainīties.

Simptomu piemēri ir:

• Zems drudzis
• Noturīgs nogurums
• Artrītam līdzīgas sāpes
• Sarkani izsitumi
• Ādas jutība pret gaismu
• Matu izkrišana
• Sāpes muskuļos
• Roku vai kāju nejutīgums vai tirpšana
• Orgānu un audu iekaisums (nieres, plaušas, sirds, sirds odere, centrālā nervu sistēma vai asinsvadi)

Literatūra:

1. https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
2. "Medicīnisko priekšmetu virsraksti". Nacionālā medicīnas bibliotēka. 2013. gada 12. februāris.
3. "Antinukleāro antivielu tests: ko tas nozīmē". Amerikas Lupusa fonds. Skatīts: 2013. gada 7. jūnijā
4. Kumars, Y; Bhatia, A; Minca, RW (2009. gada 2. janvāris). "Antinukleārās antivielas un to noteikšanas metodes saistaudu slimību diagnostikā: ceļojums pārskatīts". Diagnostiskā patoloģija
5. www.autopróbciala.info
6. Kavanaugh, Arthur, Tomar, Russell, Reveille, John, Solomon, Daniel H. un citi. Antinukleāro antivielu testa un specifisko autoantivielu pret kodol antigēniem testu klīniskās lietošanas vadlīnijas. Patoloģijas un laboratorijas medicīnas arhīvi. 124. panta 1. punkts, 71. – 81. Lpp., 2000. gada janvāris

Par autoru

Sara Janovska, maģistrante, starpdisciplināru doktora studiju programma farmācijas un biomedicīnas zinātņu jomā Ļubļinas Medicīnas universitātē un Bjalistokas Biotehnoloģijas institūtā. Farmaceitisko studiju absolvente Ļubļinas Medicīnas universitātē ar specializāciju augu medicīnā. Viņa ieguvusi maģistra grādu, aizstāvot darbu farmaceitiskās botānikas jomā par ekstraktu, kas iegūti no divdesmit sūnu sugām, antioksidanta īpašībām. Pašlaik savā pētniecības darbā viņš nodarbojas ar jaunu pretvēža vielu sintēzi un to īpašību izpēti vēža šūnu līnijās. Divus gadus viņa strādāja par farmācijas maģistru atvērtajā aptiekā.

Lasiet vairāk no šī autora